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實(shí)驗室動(dòng)物組織研磨方法步驟及注意事項

?發(fā)布時(shí)間:2021-04-14 10:32:46 ?編輯作者:東方天凈 ?閱讀:2135 本文共計有827個(gè)字,預計閱讀時(shí)間3分鐘

[導讀]:實(shí)驗室對于動(dòng)物組織的研磨要使用科學(xué)的方法,以保證實(shí)驗結果的準確,本文就來(lái)詳細介紹實(shí)驗室研磨動(dòng)物組織的方法步驟及相關(guān)注意事項。

  在實(shí)驗室中,某些對于動(dòng)物的研究課題試驗,往往需要先將動(dòng)物組織進(jìn)行研磨前處理,而手動(dòng)研磨不容易達到預期的研磨效果,不能獲取到合格的檢測樣品。實(shí)驗室研磨動(dòng)物組織,我們可以借助專(zhuān)用的動(dòng)植物組織研磨儀器,簡(jiǎn)便且有效,下面天津東方天凈就來(lái)詳細介紹下動(dòng)物組織研磨方法步驟及注意事項。

TJG動(dòng)植物組織研磨儀
TJG動(dòng)植物組織研磨儀

動(dòng)物組織研磨前處理步驟

一、實(shí)驗前的準備

1、在實(shí)驗操作前,先將PBS緩沖液(磷酸緩沖鹽溶液,phosphate buffer saline)進(jìn)行4℃預冷,然后準備若干冰塊備用。

2、使用75%濃度的乙醇溶液對鑷子、剪刀進(jìn)行消毒處理,如果還需對動(dòng)物組織進(jìn)行RNA提取,還要使用酒精燈對鑷子和剪刀進(jìn)行再次消毒,以盡可能消除RNA酶。

3、所有實(shí)驗耗材都應進(jìn)行高溫高壓滅菌,以保證各種酶不會(huì )對后續實(shí)驗產(chǎn)生影響。

4、將2ml離心管置于冰塊上,并加入適量的PBS緩沖液,一般情況下,實(shí)驗所需的組織勻漿的質(zhì)量體積比為10%(即0.1g組織樣本加入1ml液體)。

5、將需要進(jìn)行研磨的組織樣本從零下80℃的冰箱內取出,置于冰上,使用滅菌后的鑷子和剪刀,將樣本切成小塊(每塊重量不宜超過(guò)0.02g,總重量不宜超過(guò)0.2g),然后放入加好相應液體的離心管中,備用。

冰箱
冰箱

6、取出已經(jīng)滅菌的氧化鋯研磨球,按照每個(gè)離心管一顆的數量,將鋯球放入離心管中。此過(guò)程需使用鑷子進(jìn)行該操作,并且盡量避免液體飛濺而導致樣本污染。

二、組織研磨

1、將放入樣品和鋯球的離心管標記好編號,然后放入專(zhuān)用的研磨適配器中,蓋好蓋子,將適配器固定在研磨機上。

裝有樣本的離心管
裝有樣本的離心管

離心管編號
離心管編號

2、設置振動(dòng)頻率為1000次/分鐘,振動(dòng)時(shí)間為5分鐘。

TJS三維振動(dòng)球磨機
TJS三維振動(dòng)球磨機

3、由于振動(dòng)過(guò)程中的撞擊和摩擦,會(huì )產(chǎn)生大量熱量,使得離心管溫度升高,所以可以選擇具有低溫控制功能的設備,或者將適配器放入液氮罐進(jìn)行預冷凍,并減少研磨時(shí)間,避免高溫對樣本的破壞。

三、組織上清的吸取及保存

1、將研磨完成后的離心管放入低溫環(huán)境下的高速離心機內,以4000rpm的速度離心30分鐘。

2、將所得的上清液用移液器取出,轉入至新的離心管內,并于零下80℃的環(huán)境長(cháng)期保存。

裝有上清液的離心管
裝有上清液的離心管

動(dòng)物組織研磨前處理注意事項

1、需要研磨的樣本一定要在冰上操作,保證低溫環(huán)境,這樣可以降低樣本中蛋白質(zhì)(或RNA)的降解速度。

2、所有實(shí)驗操作均需佩戴醫用口罩、手套,并且穿戴好實(shí)驗服。

3、在進(jìn)行離心操作前,需要提前開(kāi)啟離心機,讓離心機預冷,保持4℃左右的低溫環(huán)境。

4、研磨使用的氧化鋯研磨球一定不能多放,數量過(guò)多會(huì )導致管壁破裂,從而造成樣本丟失或污染。

5、使用移液器吸取上清液時(shí),不要吸取到沉淀。

附:實(shí)驗所需儀器、工具及試劑

  儀器:TJS三維振動(dòng)球磨機、低溫高速離心機

  工具:研磨適配器、氧化鋯研磨球、移液器、手術(shù)用剪刀、2ml離心管、鑷子

動(dòng)物組織研磨適配器
動(dòng)物組織研磨適配器

  試劑:PBS緩沖液、RIPA裂解液、75%濃度乙醇溶液、Trizol試劑

  關(guān)于實(shí)驗室動(dòng)物組織研磨的方法步驟及相關(guān)注意事項就為大家介紹到這里了,使用東方天凈TJG-215動(dòng)植物組織研磨儀或TJS三維振動(dòng)球磨機,搭配研磨適配器,就能將各類(lèi)動(dòng)物組織進(jìn)行快速有效的研磨。

本文關(guān)鍵詞:

實(shí)驗室研磨方法

標題:實(shí)驗室動(dòng)物組織研磨方法步驟及注意事項 地址:http://www.meowah.com/baike/266.html

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    買(mǎi)球磨儀還是得買(mǎi)皮帶式傳動(dòng)那種,之前齒輪式傳動(dòng)的儀器噪音大的很,什么油封靜音,幾個(gè)月之后就不管用了,油干了,那些廠(chǎng)家售后也跟不上

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